HPLC泵的十個(gè)使用要點(diǎn)分析

HPLC是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，其以液體作為流動(dòng)相，并采用顆粒極細(xì)的固定相的柱色譜分離技術(shù)。HPLC因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點(diǎn)且不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析，世界各國已將該法收載于藥典。

 

1、操作泵之前，用至少兩個(gè)體積（標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30mL，對微脫氣機(jī)10mL）沖洗真空脫氣機(jī)，特別是當(dāng)泵關(guān)閉了一段時(shí)間后(例如：過夜)，以及在通道中使用揮發(fā)性混合溶劑時(shí)，防止溶劑瓶內(nèi)的玻璃濾頭(過濾器)堵塞及長菌，當(dāng)濾頭表面有黑色或黃色污染層說明發(fā)生了堵塞，應(yīng)立即清洗或更換。

2、將裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上面或較高處。當(dāng)在四元泵上使用鹽溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，建議將鹽溶液接在下面的梯度閥口上，將有機(jī)溶劑接在上面的梯度閥口上，有機(jī)溶劑通道建議在水或鹽溶液通道的正上面。建議用水定期沖洗所有MCGV通道除去可能在閥口析出的鹽結(jié)晶。
 

3、定期檢查排液閥的過濾白頭。檢查方法：擰開排液閥，以水作流動(dòng)相。

對于標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)(G1322A)，流速5ml/min水，若壓力大于10bar，則建議更換。 

對于微量脫氣機(jī)(G1379A)，流速2ml/min水，若壓力大于5bar，則建議更換。

4、當(dāng)使用低流速時(shí)，檢查所有1/16英寸接頭有無滲漏（用壓力測試或漏液測試。每當(dāng)更換泵密封墊時(shí)排液閥慮芯也應(yīng)更換。

5、更換活塞密封墊時(shí)檢查活塞桿上是否有劃痕。有劃痕的活塞將導(dǎo)致輕度滲漏，并降低密封墊的使用壽命。應(yīng)盡早更換有劃痕的活塞。

6、使用緩沖溶液時(shí)，關(guān)泵前先用水沖洗系統(tǒng)。當(dāng)需要長時(shí)間使 用0.1摩爾或更高濃度的緩沖液時(shí)，建議選用密封墊清洗附件，以減少對密封墊及活塞桿的磨損。

7、如果使用了高濃度的緩沖鹽，可以考慮用熱水（50-60℃）來沖洗鹽通道來確保沒有緩沖鹽殘留在系統(tǒng)中。

8、更換活塞密封墊后應(yīng)按照密封墊安裝步驟對其進(jìn)行磨合，但磨合不適用于正相密封墊。

9、當(dāng)泵頭安裝有柱塞清洗附件時(shí)，由于該附件中也有密封墊，這樣就會增加活塞桿運(yùn)動(dòng)時(shí)的阻力。所以開泵前一定要用10％異丙醇，并將其流速調(diào)至約2－3滴/分鐘使溶液流過沖洗裝置。(對于二元泵SL，如果不使用鹽溶液可以不開)10％異丙醇有助于降低水的表面張力，并有抑菌作用。不要用其它溶劑代替。
 

10、當(dāng)泵頭安裝有沖洗附件而不開啟10％異丙醇，會使密封墊及活塞桿的壽命減短(二元泵SL除外)，泵頭如果發(fā)出“吱吱”聲不影響使用和泵的精度如果有必要，可以改變壓縮因子（compressibility）來達(dá)到更好的效果。